NF-κB p65/TNF-α对PPROM孕妇胎膜细胞凋亡的影响

目的 探讨核转录因子kappa B p65（nuclear factor-kappa B p65,NF-κB p65）/肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）对未足月胎膜早破（preterm premature rupture of membranes, PPROM）孕妇胎膜细胞凋亡的影响。方法 选取2021年6月至2022年6月于南华大学附属娄底医院分娩的57例孕妇为研究对象，PPROM孕妇27例为试验组，正常足月分娩孕妇30例为对照组，采集分娩时胎膜组织。利用HE染色法观察胎膜组织结构；免疫组织化学法检测胎膜NF-κB p65和磷酸化NF-κB p65（p-NF-κB p65）的表达；TUNEL检测胎膜细胞凋亡；Western Blotting检测胎膜NF-κB p65、p-NF-κB p65、TNF-α和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3）蛋白表达水平；qRT-PCR检测胎膜组织NF-κB p65、TNF-α和Caspase-3 mRNA表达；分析PPROM孕妇胎膜p-NF-κB p65/NF-κB p65比值、TNF-α蛋白表达水平与胎膜细胞凋亡指数的相关性。结果 HE染色结果显示对照组胎膜组织结构较完整，试验组胎膜组织结构排列紊乱、胶原纤维层变薄、细胞胞质呈现大量空泡化；免疫组化结果显示NF-κB p65主要表达于胎膜细胞的细胞质，p-NF-κB p65表达于胎膜细胞的细胞核；试验组胎膜NF-κB p65、TNF-α、Caspase-3蛋白和mRNA表达以及细胞凋亡指数均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）;试验组p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白比值高于对照组（P<0.01）;试验组p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白比值与细胞凋亡指数呈正相关（相关系数r1=0.897,P<0.01）;试验组p-NF-κB p65/NF-κB p65与TNF-α蛋白表达水平呈正相关（r2=0.835,P<0.01）;试验组TNF-α蛋白表达水平与胎膜细胞凋亡指数呈正相关（r3=0.934,P<0.01）。结论 NF-κB p65可通过促进下游基因TNF-α表达，进而上调Caspase-3,引起胎膜细胞凋亡，参与PPROM的发生。