The increasing number of factors to be taken into account in the oestrogen transcriptional process has created a need to develop a rapid screening method to evaluate their role in physiology and pathology. Molecular biology techniques enable gene expression studies at the mRNA level with small amounts of tissues. We therefore developed a semi-quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) technique using fluorescent oligonucleotides to analyse simultaneously a large panel of interrelated genes involved in the oestrogen transcriptional pathway using a moderately expressed housekeeping gene, the hypoxanthine phosphoribosyltransferase gene (HPRT), as the reference gene. Expression levels of oestrogen receptors (ER alpha, ER beta), cofactors AIB1, RIP140, SMRT and the Fas-associated protein-tyrosine phophatase-1 (FAP-1) genes were evaluated in breast, endometrial and ovarian cancer cell lines and in three ER alpha-positive and three ER alpha-negative breast cancer tumours. This technique provides a rapid and reliable way to quantitate simultaneously numerous mRNAs of genes involved in the oestrogen pathway from small amounts of tissues.
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EMBRAPA Recursos Genéticos e Biotecnologia, CP 02372. Final W5 Norte, Brasília, DF, Parque Estação Biolágica
EMBRAPA Semiárido, Petrolina, PEEMBRAPA Recursos Genéticos e Biotecnologia, CP 02372. Final W5 Norte, Brasília, DF, Parque Estação Biolágica
Morgante C.V.
Guimarães P.M.
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Guimarães P.M.
Martins A.C.Q.
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EMBRAPA Recursos Genéticos e Biotecnologia, CP 02372. Final W5 Norte, Brasília, DF, Parque Estação Biolágica
Universidade de Brasília, Campus i, Brasília, DFEMBRAPA Recursos Genéticos e Biotecnologia, CP 02372. Final W5 Norte, Brasília, DF, Parque Estação Biolágica
Martins A.C.Q.
Araújo A.C.G.
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Araújo A.C.G.
Leal-Bertioli S.C.M.
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Leal-Bertioli S.C.M.
Bertioli D.J.
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Universidade de Brasília, Campus i, Brasília, DF
Universidade Catálica de Brasília, Campus II, Brasília, DFEMBRAPA Recursos Genéticos e Biotecnologia, CP 02372. Final W5 Norte, Brasília, DF, Parque Estação Biolágica
Bertioli D.J.
Brasileiro A.C.M.
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N CAROLINA STATE UNIV,COLL VET MED,DEPT MICROBIOL PARASITOL & PATHOL,RALEIGH,NC 27606N CAROLINA STATE UNIV,COLL VET MED,DEPT MICROBIOL PARASITOL & PATHOL,RALEIGH,NC 27606
ROTTMAN, JB
FREEMAN, EB
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FREEMAN, EB
TONKONOGY, S
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TONKONOGY, S
TOMPKINS, MB
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