雷公藤MCT基因RNAi对雷公藤萜类活性成分生物合成的影响

被引：7

作者：

宋雅迪 ^{[1
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赵瑜君 ^{[2
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陈上 ^{[1
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胡添源 ^{[1
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张睿 ^{[1
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王家典 ^{[1
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卢鋆 ^{[1
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王秀娟 ^{[1
,3
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高伟 ^{[1
,3
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黄璐琦 ^{[2
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机构：

[1] 首都医科大学中医药学院

[2] 中国中医科学院中药资源中心道地药材国家重点实验室培育基地

[3] 首都医科大学中医药学院中医络病研究北京市重点实验室

来源：

药学学报 | 2018年 / 53卷 / 08期

基金：

北京市自然科学基金;

关键词：

雷公藤; TwMCT; RNAi; 雷公藤甲素; 雷公藤红素;

D O I：

10.16438/j.0513-4870.2018-0397

中图分类号：

S567.19 [];

学科分类号：

1008 ;

摘要：

MCT是萜类生物合成MEP途径上重要的关键酶,本研究利用Gateway克隆重组技术构建TwMCT基因的RNAi表达载体,得到了大小为484 bp的载体片段。通过基因枪技术将TwMCT RNAi载体转入到雷公藤悬浮细胞。采用UPLC测定雷公藤萜类活性成分的含量,结果显示细胞中雷公藤甲素和雷公藤红素的含量相对于对照组p K7GWIWG2D分别下降了23.4%和42.8%。同时利用q RT-PCR检测TwMCT基因及萜类合成途径上主要基因的表达量,结果表明,相对于对照组p K7GWIWG2D,TwMCT表达量下降了29.2%,TwDXR、TwGGPS、TwHMGR和TwHMGS的相对表达量分别下降了36.3%、31.3%、62.2%和29.1%,但TwDXS的表达量上调了114.2%,而TwFPS没有显著性变化。本研究在体内验证了干扰TwMCT的表达对雷公藤萜类活性成分雷公藤甲素和雷公藤红素的积累有显著抑制作用,为进一步探究MCT基因对雷公藤萜类成分生物合成的调控机制奠定基础。

引用

页码：1209 / 1214

页数：6

共 21 条

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