噬菌体随机肽库分析HIV-1 p24抗原表位

被引：1

作者：

孟淑芳

李秀华

尹红章

宋爱京

李德富

机构：

[1] 中国药品生物制品检定所卫生部生物技术产品质量标准化研究重点实验室

来源：

中华微生物学和免疫学杂志 | 2003年 / 01期

关键词：

HIV-1; 核心区抗原p24; 噬菌体随机肽库; 单克隆抗体;

D O I：

暂无

中图分类号：

R392 [医学免疫学];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的　利用噬菌体随机肽库分析抗HIV 1核心区抗原p2 4单抗在抗原上的识别位点。方法　用抗HIV 1p2 4单抗 2C7和 3H10作为筛选分子 ,对噬菌体肽库进行生物淘洗 (biopanning) ,并通过DNA测序、ELISA效价测定等对所获得的噬菌体克隆进行鉴定 ,最后对合成的 7肽位点通过间接ELISA及竞争抑制试验进行血清学分析。结果　序列分析结果表明 ,单抗 2C7和 3H10在HIV 1p2 4上的抗原识别表位的保守序列分别为DHPXPXX和XXXXKAF。分别合成这 2个 7肽氨基酸序列P C1(DHPSPWG)和P H3(SPWLKAFGGGS) ,并分析其免疫学结合特性 ,结果表明与P H3相比 ,单抗 2C7的抗原识别表位P C1的固相结合特性较好 ,固相P C1检测血样 ,13份抗HIV阳性样本中 ,12份为阳性(检出率为 92 .3% ) ,19份抗HIV阴性样本中 ,仅 1份为假阳性结果 (特异性为 94.7% )。与P C1相比 ,单抗 3H10的抗原表位P H3的固相结合能力极差 ,但液相结合活性较好 ,血样与P H3的抑制试验表明 ,13份抗HIV阳性样本中 12份样本对P H3的抑制率大于 6 0 % (12 13) ,而 9份抗HIV阴性样本中仅 1份对P H3的抑制率大于 5 0 %。结论　用抗HIV 1p2 4单抗筛选噬菌体随机肽库 ,获得单抗在p2 4抗原上的识别表位的氨基酸序列 ,血清学结果表明这 2个抗原表位存在于p2 4自然抗原上 ,在抗HI

引用

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