与HIV-1共感染的HHV-6毒株的分离、传代培养与鉴定

目的:对一株从中国河南省一名艾滋病患者体内分离的、可在MT4细胞上稳定传代的未知病毒29A进行鉴定,确定该病毒种类及型别。方法:用从该患者外周血单核细胞中分离的病毒株感染MT4细胞,获得可在该细胞上稳定传代的病毒株29A。通过细胞病变特征、电镜观察结果、H IV-1p24抗原检测以及H IV-1 pol区基因扩增结果,对该毒株是否为H IV-1进行鉴别。在电镜下对病毒感染细胞的超薄切片进行观察,发现该病毒呈现疱疹病毒形态特征,因此设计人类疱疹病毒6型(HHV-6)U69、U16/U17、U60/U66三个不同基因片段的特异性引物并进行巢式PCR扩增,对扩增产物进行序列测定和结果分析。结果:该毒株H IV-1 p24抗原检测为阴性;用H IV-1 pol区特异性引物未扩增出目的片段;细胞病变形态不同于H IV-1引起的病变;电镜观察该病毒直径为160～200 nm,明显大于H IV-1,表明该传代株不是H IV-1。用人类疱疹病毒6型(HHV-6)U69、U16/U17、U60/U66等基因的特异性引物均扩增出了目的片段,序列分析的结果表明该毒株为HHV-6病毒B亚型。结论:在国内首次从艾滋病患者的外周血淋巴细胞中分离出HHV-6,为进一步研究HHV-6和H IV-1的相互作用奠定了基础。