壳寡糖对大肠杆菌的抑制作用

背景:已有实验证明,抗菌抑菌作用是壳寡糖的最主要活性之一。目的:研究壳寡糖对大肠杆菌的抑菌效果。设计、时间及地点:生物工程实验,于2007-06/2008-10在河南师范大学微生物实验室完成。材料:壳聚糖为郑州世纪百川食品添加剂有限公司产品,脱乙酰度93%,相对分子质量290000。方法:高产壳聚糖酶菌株接种至5L的发酵罐中发酵培养,所得壳聚糖酶粗酶液经乙醇沉淀获得壳聚糖混合酶。壳聚糖混合酶经过HiTrapSP阳离子交换柱分离纯化得壳聚糖外切酶和壳聚糖内切酶,分别用壳聚糖混合酶,壳聚糖外切酶和壳聚糖内切酶降解质量浓度10.0g/L壳聚糖,最终制备5种不同相对分子质量壳寡糖S1,S2,S3,S4,S5,相对分子质量分别为500,2100,3700,5200,9000,在不同浓度不同pH值下对大肠杆菌抑菌活性进行实验分析。主要观察指标:不同相对分子质量的壳寡糖对大肠杆菌生长的影响;不同质量浓度壳寡糖对大肠杆菌抑菌活性;pH值对壳寡糖抑菌活性的影响。结果:在8h之内,5种壳寡糖对大肠杆菌均有明显的抑菌效果。培养8h之后:S1,S4和S5的抑菌效果逐渐减弱。培养16h之后:S1培养基中大肠杆菌的数量超过正常状态。相对分子质量2100的壳寡糖对大肠杆菌抗菌作用最强。其抑菌作用随壳寡糖质量浓度的增加而增强。测得pH值5.0,5.5,6.0,6.5和7.0壳寡糖S2溶液对大肠杆菌抑菌活性分别为0.097,0.086,0.061,0.081,0.091,在pH值6.0附近,壳寡糖S2对大肠杆菌抑制作用最好。结论:壳寡糖的相对分子质量大小是抑制大肠杆菌生长的主要影响因素。