柑桔素抑制CYP450 3A4活性并减轻异烟肼和利福平合用的肝细胞毒性

目的研究柑桔素对异烟肼和利福平导致肝毒性增加的防治作用及CYP3A4在其中的作用机制。方法将培养的QSG-7701人肝细胞培养液中分别加入异烟肼和利福平,同时加入不同剂量(1、5、25mg.L-1)的柑桔素后继续培养48h。分别收集药物处理后的培养液和细胞,将细胞裂解后,用比色法分别测定培养液和细胞裂解液中的乳酸脱氢酶的活性,计算细胞外和细胞内乳酸脱氢酶的比值。药物处理48h后,将细胞与CYP3A4作用底物咪达唑仑共同孵育2h,采用高效液相色谱质谱联用法测定咪达唑仑浓度的变化,计算细胞内CYP3A4的活性。结果与对照组比较,异烟肼和利福平合用使肝细胞乳酸脱氢酶释放增加,CYP3A4活性增强;5、25mg.L-1的柑桔素均可减弱异烟肼和利福平升高乳酸脱氢酶的作用,但未使其恢复正常水平;5mg.L-1的柑桔素还减弱了异烟肼和利福平合用导致CYP3A4活性增强的作用,但也未使其恢复正常水平。结论异烟肼和利福平合用对人肝细胞具有细胞毒性作用,柑桔素可以通过抑制其升高CYP3A4活性的作用而减轻肝细胞的损伤。