miR-122启动子序列的克隆及特异性分析

被引：1

作者：

张超 ^{[1
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武帅钦 ^{[2
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林乐勋 ^{[2
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陈晓凤 ^{[2
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杨爱英 ^{[1
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沃晓嫚 ^{[1
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钟照华 ^{[2
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赵文然 ^{[1
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机构：

[1] 哈尔滨医科大学细胞生物学教研室

[2] 哈尔滨医科大学微生物学教研室

来源：

国际遗传学杂志 | 2011年 / 06期

关键词：

miR-122; 启动子; 肝特异性; 报告基因;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的 miRNA-122启动子序列的预测、克隆及特异性分析。方法分别从肝癌细胞系Huh-7及HepG2中扩增出预测的miR-122启动子,并将其克隆至含荧光素酶(fireflyluciferase,Fluc)报告基因pGL4.17质粒上,用重组质粒转染IHuh-7、HepG2及HeLa细胞,分析启动子的特性。结果成功预测并克隆出miR-122的启动子序列。重组质粒转染细胞后,启动子能够启动Fluc的表达。用含启动子P1的重组载体pGL4.17-P1转染HeLa细胞后,用两种荧光素酶检测体系测得重组载体中荧光素酶的表达水平显著高于对照组(t=0.000 21,P<0.01及t=0.000 38,P<0.01)。结论 Huh-7、HepG2细胞中miR-122表达差异与启动子序列缺失无关。而受miR-122启动子调节的报告基因在非肝细胞系(HeLa)中也表达,表明miR-122启动子不具有肝细胞特异性。

引用

页码：287 / 293

共 3 条

[1]

miR-122 targets an anti-apoptotic gene, Bcl-w , in human hepatocellular carcinoma cell lines[J] . Cliff Ji-Fan Lin,Hong-Yi Gong,Hung-Chia Tseng,Wei-Lun Wang,Jen-Leih Wu.Biochemical and Biophysical Research Communications . 2008 (3)

[2]

miR-122, a Mammalian Liver-Specific microRNA, is Processed from hcr mRNA and MayDownregulate the High Affinity Cationic Amino Acid Transporter CAT-1[J] . Jinhong Chang,Emmanuelle Nicolas,Debora Marks,Chris Sander,Anthony Lerro,Marie Annick Buendia,Chunxiao Xu,William S. Mason,Thomas Moloshok,Roque Bort,Kenneth S. Zaret,John M. Taylor.RNA Biology . 2004 (2)

[3]

Regulation of hepatitis C virus by microRNA-122 .2 Jopling Catherine L. Biochemical Society transactions . 2008

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