黑色素瘤抗原MAGE-A9基因在真核细胞中的表达研究

被引：3

作者：

于智勇 ^{[1
]}

薛庆於 ^{[1
]}

沈维干 ^{[2
]}

机构：

[1] 扬州教育学院生物系

[2] 扬州大学医学院

来源：

细胞与分子免疫学杂志 | 2008年 / 06期

关键词：

MAGE-A9; 真核表达; 稳定细胞系;

D O I：

10.13423/j.cnki.cjcmi.004707

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

目的:克隆MAGE-A9基因并对其进行真核表达及鉴定。方法:通过逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)从原发性肝癌的细胞中扩增MAGE-A9基因片段,将该片段克隆在真核表达载体pEGFP-C3中,转染NIH3T3细胞,经G418筛选,构建稳定表达细胞系,并用荧光显微镜和Western blot对其进行鉴定。结果:经RT-PCR扩增出945bp基因片段,经测序分析并与GenBank的DNA序列比对分析后,在NIH3T3细胞中表达。G418筛选后,细胞荧光信号较强,Western blot检测,细胞中的融合蛋白能够与抗MAGE-A9的多抗结合。结论:成功地扩增了肝细胞肝癌中的MAGE-A9基因全长cDNA并进行真核表达与鉴定。

引用

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