去势雌干眼症模型鼠睑板腺上皮细胞凋亡及其组织损伤

目的:建立去势雌干眼症动物模型并探讨干眼症模型鼠睑板腺上皮细胞凋亡、相关基因表达与组织损伤的关系。方法:实验于2003-07/2004-07在青岛大学医学院附属医院动物实验中心及眼科病理室完成。①实验动物:清洁级健康成年Wistar雌性大白鼠20只,体质量180～200g,无眼疾患。②实验分组:采用随机数字表法分为去势雌组及对照组,每组10只。③实验干预:去势雌组摘两侧卵巢。对照组按相同方法找到卵巢后不摘除。去势雌组分别于手术前和手术后2,3,4,5,6个月行Schirmer试验、泪膜破裂时间及角膜荧光素染色检测。④去势雌组分别于术前、术后第1天、第9天心脏穿刺取血,采用化学发光法测量血清雌二醇水平(取血后有数只大鼠死亡,分别按上述步骤补齐);6个月后麻醉下处死两组动物,取睑板腺进行病理组织学观察,并采用免疫组织化学方法检测睑板腺上皮细胞中的Bax、bcl-2等相关基因蛋白的表达。结果:20只大鼠进入结果分析。①血清雌激素水平测定结果:去势雌组术后血清雌二醇水平明显低于手术前[(16.34±3.15),(43.57±2.81)ng/L,P<0.01]。②两组大鼠眼表损害的检查结果:去势雌组5个月起泪膜破裂时间明显低于正常对照组,且随观察时间的延长差异有显著性(P<0.01);4个月起角膜荧光素染色阳性,且随观察时间延长加重。③两组大鼠睑板腺光镜观察:病理学观察去势雌鼠睑板腺腺细胞萎缩,腺管扩展。④两组大鼠睑板腺上皮凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达:睑板腺上皮细胞中Bax阳性表达的细胞数明显高于对照组(P<0.01);bcl-2阳性表达的细胞数明显低于对照组(P<0.01)。结论:去势后雌鼠雌二醇水平明显低下,睑板腺上皮细胞中Bax增加及bcl-2减少均与促进细胞凋亡有关,可能是导致组织学改变进而功能丧失引起干眼症的原因之一。