肝细胞癌中miR-574-5p的表达与作用及其与预后的关系

背景与目的:研究表明,miR-574-5p与多种肿瘤预后密切相关,但尚未见miR-574-5p与肝细胞癌(HCC)的关系报道。因此,本研究初步探讨miR-574-5p在HCC中表达及其与患者预后的关系。方法:用qRT-PCR检测130例HCC与癌旁组织及HCC细胞系(HepG2、MHCC-97H)与正常肝细胞系(L-02)中miR-574-5p的表达,用X-tile软件在患者生存数据中确定miR-574-5p表达量的最佳截断值后,分析miR-574-5p表达水平与患者临床病理因素于术后生存率的关系。分析HCC患者预后的影响因素。用TargetScan预测miR-574-5p的靶基因,并用双荧光素酶报告基因实验验证与Western blot实验确证。结果:miR-574-5p表达水平在HCC癌组织中明显高于癌旁组织,在HCC细胞系中明显高于正常肝细胞系(均P<0.05)。miR-574-5p表达与TNM分期(P=0.002)和分化程度(P=0.000)明显有关。miR-574-5p高表达组的总生存率与无瘤生存率均明显低于miR-574-5p低表达组(均P<0.01)。单因素与多因素分析结果显示,miR-574-5p高表达(HR=4.101,95%CI=1.348～8.968,P=0.03)、III～IV期(HR=5.403,95%CI=1.266～13.860,P=0.02)及中低分化(HR=3.655,95%CI=2.165～6.984,P=0.00)是HCC患者总生存率的独立危险因素,miR-574-5p高表达(HR=7.168,95%CI=1.144～18.260,P=0.01)与III～IV期(HR=7.436,95%CI=1.123～20.916,P=0.00)是HCC患者无瘤生存率的独立危险因素。TargetScan软件发现FOG2存在和miR-574-5p直接结合位点,双萤光素酶报告基因实验表明FOG2是miR-574-5p的直接靶基因。Western blot结果显示,FOG2蛋白在HCC组织中的表达量低于癌旁组织;Pearson相关分析表明,HCC组织中miR-574-5p表达水平与FOG2蛋白表达水平呈负相关(r=-0.499,P<0.05)。结论:miR-574-5p在HCC中普遍升高,miR-574-5p高表达可作为HCC患者预后不良的分子标志物,miR-574-5p可能通过下调其靶基因FOG2发挥促癌作用。