人类免疫缺陷病毒DNA疫苗黏膜免疫小鼠免疫力研究

目的以人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)疫苗免疫BALB/c(H-2d)小鼠为模型,探讨有效活化黏膜与系统免疫力的策略。方法将6～8周龄BALB/c小鼠随机分为6组,每组3只;利用DNA疫苗加或不加疫苗佐剂滴鼻途径进行黏膜引导免疫,利用重组痘苗天坛株疫苗进行系统加强的策略以提高机体免疫反应。DNA疫苗免疫时间是0、14、28d,剂量每只小鼠10μg/次;重组痘苗病毒加强免疫时间是第42天,剂量每只小鼠1×107PFU/次。初次免疫后第56天处死小鼠。ELISPOT和胞内染色测定T淋巴细胞免疫反应;ELISA法测血清特异的IgG和鼻咽部、肺部灌洗液特异的IgA。结果单独DNA疫苗黏膜免疫后只活化微弱的系统T细胞免疫(2±1)斑点形成细胞(spotformingcells,SFC/106个细胞),黏膜共同施用霍乱毒素可提高相应的系统T细胞免疫力(14±11SFC/106个细胞),重组痘苗天坛株疫苗系统加强后,分泌γ-干扰素(IFN-γ)的特异性T淋巴细胞升高4·5倍(61±35SFC/106个细胞);胞内染色可获得1·8%±1·4%HIV-1Gag特异性CD8+T细胞免疫反应,同时,血清中特异性IgG抗体与肺部灌洗液的特异性IgA抗体水平在痘苗天坛株疫苗系统加强后分别提高2倍吸光度(A)值:1·5±0·3和2·5倍(A值:1·8±0·8)。结论黏膜进行引导免疫并辅以系统加强的免疫策略可诱发有效的黏膜、系统体液免疫反应和T淋巴细胞免疫。