RNA interference-mediated silencing of MAT 2A gene attenuates growth and induces apoptosis of hepatoma cells

被引：0
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作者：
刘权焰
刘志苏
邬开朗
朱应
机构：
[1] 武汉大学中南医院普外科
[2] 武汉大学生命科学院现代医学病毒室
[3] 武汉大学生命科学院现代医学病毒室 430071
来源：
中华肝脏病杂志 | 2005年 / 05期
关键词：
癌; 肝细胞; 甲硫氨酸腺苷转移酶; 基因; 肿瘤抑制; 基因疗法;
D O I：
暂无
中图分类号：
R735.7 [肝肿瘤];
学科分类号：
100214 ;
摘要：
目的研究靶向甲硫氨酸腺苷转移酶(MAT)2A基因的小干扰RNA(siRNA)对肝癌细胞生长和细胞凋亡的影响。方法以MAT 2A为目的基因,以产生siRNA质粒载体pSilence-2.1-U6为表达模板,细胞内转录合成4条siRNA;并构建携带荧光素酶报告基因的重组质粒载体plucA-MAT 2A。脂质体转染法将重组质粒载体plucA-MAT 2A与产生siRNA的质粒pSilence-2.1-U6共转染293 T细胞,定量检测荧光素酶活性,初步筛选出抑制荧光素酶表达的有效siRNA,然后将有效的siRNA转染Bel-7402肝癌细胞,半定量逆转录聚合酶链反应检测MAT 2A mRNA表达,并检测转染后肝癌细胞MAT的活性,进一步采用四甲基偶氮唑盐法观察siRNA对肝癌细胞生长的抑制率,用流式细胞仪检测siRNA对肝癌细胞凋亡的影响。结果所合成的4条siRNA中有2条抑制荧光素酶表达,抑制效率分别为81%和89%,并特异性抑制肝癌细胞MAT 2A表达,降低了肝癌细胞中MAT活性,抑制肝癌细胞的生长,诱导肝癌细胞凋亡。结论靶向MAT 2A基因的siRNA抑制肝癌细胞生长,诱导肝癌细胞凋亡;MAT 2A是肝癌基因治疗的一个很有希望的靶位点。
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