油桐ISSR-PCR最佳反应体系的建立

被引：24

作者：

李鹏 ^{[1
]}

汪阳东 ^{[2
]}

陈益存 ^{[2
]}

张小平 ^{[1
]}

机构：

[1] 安徽师范大学生命科学学院

[2] 中国林业科学研究院亚热带林业研究所

来源：

林业科学研究 | 2008年 / 02期

关键词：

油桐; ISSR-PCR; 单因子试验; 正交设计;

D O I：

10.13275/j.cnki.lykxyj.2008.02.008

中图分类号：

S794.3 [油桐];

学科分类号：

0829 ; 0907 ;

摘要：

在油桐遗传多样性研究中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,综合采用单因子试验和正交设计两种方法对影响油桐ISSR-PCR反应结果的4个因素(Taq酶、Mg2+、dNTP、引物)进行优化试验。单因子试验分别研究各因素对ISSR-PCR反应的影响,找出最佳反应水平。正交设计选用L9(34)方案,采用直观分析获得影响因素最佳反应水平。通过综合比较分析,最终建立了油桐ISSR-PCR反应的最佳反应体系,即在20μL反应体系中,Taq DNA聚合酶1.0 U,Mg2+2.0 mmol.L-1,dNTP 0.20 mmol.L-1,引物0.4μmol.L-1,1×PCR缓冲液,40 ng模板DNA。

引用

页码：194 / 199

页数：6

共 16 条

[1] 珍稀濒危植物夏蜡梅遗传多样性的ISSR分析 [J].