荧光定量PCR法检测MDM2 T309G位点多态性

被引：1

作者：

陈红 ^{[1
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谢丽 ^{[2
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胡文静 ^{[2
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禹立霞 ^{[2
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钱晓萍 ^{[2
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刘宝瑞 ^{[2
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机构：

[1] 南京医科大学鼓楼临床医学院肿瘤中心

[2] 南京大学医学院附属鼓楼医院肿瘤中心暨南京大学临床肿瘤研究所

来源：

临床肿瘤学杂志 | 2011年 / 16卷 / 07期

关键词：

MDM2; SNP; PCR; 临床检测; 肿瘤标志物;

D O I：

暂无

中图分类号：

R450 [];

学科分类号：

摘要：

目的建立一种简便易行的MDM2基因单核苷酸多态性(SNP)309位点的检测方法。方法用DNA提取试剂盒提取外周血DNA,建立MDM2 SNP309位点荧光定量PCR熔解曲线检测法。应用煮沸法处理血样取得粗制DNA,行荧光定量PCR检测,建立位点特异引物法检测MDM2 SNP309位点基因型。比较静置不同时间、反复冻融等处理以及存在血液学指标异常的血样经煮沸法提取DNA对荧光定量PCR扩增反应的影响,通过观察PCR扩增情况,评估不同处理方法对PCR扩增反应的影响。结果荧光定量建立MDM2 SNP309位点PCR检测方法。煮沸法提取的DNA可用于普通PCR、荧光定量PCR扩增体系,且煮沸法处理血样具有较广的适用范围。结论采用MDM2基因SNP309位点特异性引物行荧光定量PCR检测法是一种简便易行的MDM2基因SNP309位点检测方法,该方法有较好的临床适用性。

引用

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