马尾松胚乳DNA高效提取及SSR-PCR体系优化

被引：7

作者：

何卫龙 ^{[1
]}

杨立恒 ^{[1
]}

王晓锋 ^{[1
]}

林能庆 ^{[2
]}

季孔庶 ^{[1
]}

机构：

[1] 南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室

[2] 福建省上杭白砂国有林场

来源：

林业科技开发 | 2013年 / 01期

关键词：

马尾松; 胚乳DNA; CTAB-SDS法; SSR-PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

S791.248 [马尾松];

学科分类号：

0829 ; 0907 ;

摘要：

以马尾松胚乳为试验材料,用CTAB-SDS法提取单粒胚乳DNA,对其浓度和纯度进行检测。结果表明:运用CTAB-SDS法提取的马尾松胚乳DNA浓度高、纯度好,琼脂糖凝胶电泳条带清晰,点样孔干净。此外,还对影响PCR结果的Mg2+、dNTP、模板DNA、引物浓度、TaqDNA聚合酶5个因素进行了正交设计试验,建立了适合马尾松SSR-PCR的反应体系:即在10μL反应体系中,Mg2+浓度为2.80 mmol/L,dNTP浓度为0.35 mmol/L,引物浓度为0.075μmol/L,模板DNA浓度为20 ng/10μL,TaqDNA聚合酶浓度为0.50 U/10μL。

引用

页码：15 / 18

页数：4

共 11 条

[1] DNA提取方法与植物种类的效应比较 [J].

刘萍 ;

代红军 ;

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[2] 利用RAPD标记和单株树大配子体构建马尾松的分子标记连锁图谱 [J].

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[3]

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[4]

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[5] 一种改良的CTAB法提取马尾松基因组DNA [J].