Cloning and expressing the E2 subunit of pyruvate dehydrogenase complex

目的 构建丙酮酸脱氢酶复合物的E2亚单位(PDC-E2)的表达载体。方法 采用逆转录聚合酶链反应技术从人淋巴细胞中扩增出PDC-E2的基因片段,克隆至pExSecI表达载体进行诱导表达,并对表达产物进行western blot和酶联免疫吸附法鉴定。 结果 成功构建了表达载体pExSecI/PDC-E2;表达产物能特异性的被原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者血清中的自身抗体识别。 结论 获得PDC-E2蛋白的高效表达,为利用原核表达PDC-E2对PBC患者进行血清学检测奠定了基础。