参麦饮含药血清对HO诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用

目的:通过观察参麦饮含药血清对过氧化氢（H2O2）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的影响，探讨参麦饮含药血清对损伤的HUVEC的保护作用及其机制。方法:15只SD大鼠随机分为3组：正常对照组及参麦饮1.1、5.4 g/kg组，每日3次灌胃给药，连续3 d。末次给药1 h后，腹主动脉取血，制备含药血清。使用不同浓度的H2O2诱导HUVEC细胞0.5 h,进行氧化应激损伤模型的建立，通过CCK-8法检测，明确H2O2的浓度为800μmo1/L时为最适的造模浓度；利用CCK-8试剂探讨含药血清作用不同时间对HUVEC细胞存活率的影响；利用CCK-8试剂进行含药血清对HUVEC细胞及H2O2损伤的HUVEC细胞存活率的影响；采用荧光染色法观察活性氧（ROS）;利用试剂盒检测丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脱氢酶（LDH）活力；采用Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡情况；蛋白免疫印迹法（Western Blot）检测细胞中PI3K、AKT、BAX、BCL-2、Caspase3的蛋白表达。结果:与空白对照组比较，模型对照组细胞存活率显著降低（P<0.01）,ROS生成量、MDA含量、LDH活力显著升高（P<0.01）,SOD活力、NO含量显著降低（P<0.01）,细胞凋亡率升高，PI3K、AKT、BCL-2蛋白表达及BCL-2/BAX的比值显著降低（P<0.01）,BAX、Caspase3蛋白表达显著上调（P<0.01）;与模型对照组比较，参麦饮1.1 g/kg 15%含药血清使细胞活力显著升高（P<0.01）,ROS生成量、MDA含量、LDH活力明显降低（P<0.05或P<0.01）,SOD活力、NO含量明显降低（P<0.05或P<0.01）;细胞凋亡率明显降低；PI3K、AKT、BCL-2蛋白表达及BCL-2/BAX的比值明显升高（P<0.05或P<0.01）,BAX、Caspase3蛋白表达明显降低（P<0.05或P<0.01）。结论:参麦饮含药血清对H2O2诱导损伤的血管内皮具有明显保护作用。