断藤益母汤对破骨细胞活性及Wnt信号通路的影响研究

目的:探讨断藤益母汤(DTYMT)对破骨细胞活性及Wnt信号通路的影响。方法:通过诱导RAW264. 7巨噬细胞建立体外破骨细胞培养体系;设空白组、模型组、断藤益母汤400、600、800、1000μg/m L浓度组、甲氨蝶呤2μg/m L组,然后通过CCK-8法检测细胞生存率,蛋白免疫印迹法检测Wnt信号通路关键蛋白表达。结果:TRAP染色试验显示,与模型组相比,DTYMT 800、1000μg/m L浓度组融合细胞数目显著减少,具有统计学意义(P <0. 01)。CCK-8结果显示,与模型组比较,DTYMD 600、800、1000μg/m L浓度组和甲氨蝶呤2μg/m L组生存率明显下降(P <0. 05,P <0. 01)。免疫蛋白印迹结果显示,与模型组相比,DTYMT 800、1000μg/m L、甲氨蝶呤2μg/m L组中Wnt3a、β-catenin蛋白表达量显著上升(P <0. 05,P <0. 01),DKK1蛋白表达水平显著下降(P <0. 05,P <0. 01)。结论:断藤益母汤可能是通过影响Wnt信号通路,即上调Wnt3a、β-catenin蛋白表达、下调DDK1蛋白表达以及抑制破骨细胞的分化和增殖而起到减缓RA的骨破坏作用。