非洲猪瘟TaqMan实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用

被引：24

作者：

杜楠楠 ^{[1
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高飞 ^{[2
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姜一峰 ^{[2
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郑浩 ^{[2
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童武 ^{[2
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李国新 ^{[2
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张宽 ^{[2
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张玉娇 ^{[2
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黄剑 ^{[1
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童光志 ^{[2
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机构：

[1] 福建农林大学动物科学学院

[2] 中国农业科学院上海兽医研究所

[3] 扬州大学江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心

来源：

中国兽医科学 | 2020年 / 50卷 / 04期

关键词：

非洲猪瘟病毒; p17蛋白; D117L基因; 实时荧光定量PCR;

D O I：

10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0054

中图分类号：

S852.651 [];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

为建立检测非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）的快速诊断方法,本研究根据ASFV SY18株p17蛋白的编码基因D117L的保守序列设计并合成引物和探针,建立了基于ASFV p17蛋白的编码基因D117L的TaqMan荧光定量PCR检测方法,并验证其特异性、灵敏性和重复性。结果显示,本研究建立的TaqMan荧光定量PCR检测方法的C_t值与标准品在1×10～9～1×10～1copies/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.998,斜率为-3.192,检测下限为10 copies/μL,且与其他能引起相似症状的猪源病毒无交叉反应。重复性试验结果显示,组间与组内变异系数均小于1.920 7%,重复性好。此方法可用于ASF的早期诊断和ASFV快速检测。

引用

页码：423 / 429

页数：7

共 9 条

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