玉米RAPD程序优化研究及其初步探讨

本文以黄早四、汶黄、Mo17等我国主要玉米自交系为材料,使用国产PCR仪,对玉米RAPD分析中PCR过程的DNA模板浓度,扩增反应的循环数进行了研究,并针对国产PCR扩增仪(PCR—90AD)的特点,确定了DNA变性,引物和模板DNA结合,引物沿模板延伸3个步骤的时间。实验结果表明玉米PCR过程使用10～15ng的模板DNA,在94℃模板变性时间1分30秒,36℃引物退火2分钟,72℃引物延伸2分30秒,扩增循环35～40周期条件下扩增效果较好,使用这一RAPD程序研究不同自交系间遗传差异,结果与系谱法基本一致,而同一自交系的10个单株之间,RAPD带型是一致的。本实验建立了适合玉米RAPD分析的PCR程序及条件,为RAPD分析法应用于玉米的遗传研究打下了良好的基础。