弗氏2a志贺氏菌2457T株YciD蛋白的融合表达和纯化

被引：0

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作者：

刘先凯 ^{[1
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高美琴 ^{[1
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孙忠科 ^{[1
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冯尔玲 ^{[1
]}

朱力 ^{[1
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王恒樑 ^{[1
]}

机构：

[1] 军事医学科学院生物工程研究所

[2] 华中农业大学食品科技学院

来源：

生物技术通讯 | 2009年 / 20卷 / 01期

关键词：

弗氏2a志贺氏菌2457T株; YciD蛋白; 融合蛋白; 表达; 纯化;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）]; Q93 [微生物学];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ; 071005 ; 100705 ;

摘要：

目的:原核表达重组弗氏2a志贺氏菌2457T株YciD蛋白,为其功能研究奠定基础。方法:用PCR方法从弗氏2a志贺氏菌2457T株染色体中扩增YciD蛋白编码序列,经过纯化、酶切后克隆到原核表达载体pET32a中,构建重组载体pET32a-yciD,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株获得工程菌株,对其表达和纯化条件进行优化;利用WesternBlot检测融合蛋白的表达。结果:构建了YciD蛋白的融合表达载体,并在大肠杆菌中获得高效表达;经Ni-NTA亲和层析柱纯化获得了高纯度的YciD蛋白;WesternBlot表明,此蛋白可与His标签抗体反应,表明获得了目的蛋白。结论:在原核表达系统中表达、纯化弗氏2a志贺氏菌2457T株YciD蛋白,为进一步对其进行功能研究奠定了基础。

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