基于CRISPR/Cas9构建基因编辑小鼠sgRNA有效性验证研究

被引：0
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作者：
许文豪
周婉
臧敦安
巩雪洁
刘庆华
于孟飞
薛璐
彭勇波
机构：
[1] 中南民族大学生命科学学院
来源：
湖北农业科学 | 2018年 / 57卷 / 24期
关键词：
CRISPR/Cas9; 小鼠; sgRNA有效性; 囊胚;
D O I：
10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.24.042
中图分类号：
Q78 [基因工程（遗传工程）];
学科分类号：
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要：
以小鼠S100A9基因为例,设计针对该基因的sgRNA,体外转录后与Cas9 mRNA通过显微注射入受精卵,选取囊胚期的胚胎,单枚独立进行基因型分析,并综合得出编辑效率。结果表明,显微注射113枚受精卵,其中28枚成功发育到囊胚期,其中有5枚囊胚在特定位点产生了基因突变,总编辑效率为18%。该方法操作简单,可快速对sgRNA活性进行体内验证,并为后续基因编辑小鼠的制备提供基础。
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页数：4
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