壳聚糖通过miR-29b介导TGF-β1/Smad3通路抑制肌腱成纤维细胞生长的研究

目的研究壳聚糖在肌腱损伤修复术后抑制成纤维细胞生长的分子机制。方法对跟腱损伤大鼠在术中给予壳聚糖处理,8周后检测肌腱滑动距离和总胶原含量。同时分离修复后肌腱组织中的成纤维细胞,给予不同浓度壳聚糖处理,检测细胞成活率、凋亡和细胞周期。此外,RT-PCR检测肌腱组织和成纤维细胞中miRNAs,Western blot检测TGF-β1、Smad3和P21蛋白的表达。结果壳聚糖可以增加大鼠术后肌腱滑动距离并降低胶原纤维的含量,抑制成纤维细胞生长并使其停留在生长周期的G1期。此外,在修复后的肌腱组织和体外成纤维细胞中均发现壳聚糖显著上调miR-29b的表达,同时显著增加P21蛋白表达,而下调TGF-β1和Smad3的蛋白表达。在成纤维细胞中,miR-29b抑制剂可逆转壳聚糖引起miR-29b、TGF-β1、Smad3和P21表达的改变。结论壳聚糖能促进大鼠跟腱损伤术后的肌腱修复,miR-29b通过下调TGF-β1、Smad3、上调P21表达促使成纤维细胞停留在G1期,这可能是壳聚糖在修复损伤肌腱过程中发挥积极作用的机制之一。