发根农杆菌介导的荔枝LcMYB1转化烟草叶片的研究

被引:5
作者
秦雅琪
胡桂兵
赵杰堂
机构
[1] 华南农业大学园艺学院亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室华南地区园艺作物生物学与种质创制农业部重点实验室广东省荔枝工程技术中心
关键词
荔枝; 花青苷; MYB; 发根农杆菌; 烟草; 转基因; 毛状根;
D O I
10.16420/j.issn.0513-353x.2019-0695
中图分类号
Q943.2 [植物基因工程];
学科分类号
071007 ; 090102 ;
摘要
利用荔枝果皮花青苷生物合成的关键调节基因LcMYB1为标记,构建植物表达载体pBA002-LcMYB1,电转法转入发根农杆菌A4菌株,通过叶盘法转化烟草K326。结果表明,烟草叶片侵染一周后长出白色的毛状根,约3周后部分毛状根逐渐变成红色,毛状根诱导率为100%,红色毛状根诱导率为19.9%。当筛选培养基中添加5 mg·L-1 Basta,毛状根诱导率降低为33.3%,但红色毛状根诱导率提高到75%。高效液相色谱分析表明,红色毛状根中积累矢车菊素–3–葡萄糖苷和矢车菊素–3–芸香糖苷,PCR检测证实红色毛状根是由LcMYB1的转入引起的。实时荧光定量PCR表明转LcMYB1可以诱导烟草毛状根中花青苷生物合成相关的结构基因和调节基因表达。
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