小鼠miR-214重组慢病毒载体的构建和鉴定The construct of the lenttviral egression system earring miR-214 in mice

目的 构建携带miR-214的重组慢病毒表达载体,为研究miR-214的功能和作用机制奠定基础。方法 从小鼠基因组DNA扩增miR-214基因,测序鉴定后克隆至pCDH-CMV-MCS-EF1-copGFP慢病毒载体上,测序鉴定、病毒包装后转染HEK293细胞,测定病毒滴度。将重组慢病毒载体感染HEK293细胞,应用萤光定量PCR法检测miR-214表达。结果 重组慢病毒载体pCDH-CMV-miR-214-EF1-copGFP测序完全正确,pCDH-CMV-miR-214-EF1-copGFP感染的HEK293细胞中miR-214表达显著增强。结论 成功构建小鼠miR-214重组慢病毒载体,并可在HEK293细胞中稳定表达出miR-214,为进一步进行miR-214的功能和机制研究奠定了试验基础。