去泛素酶复合体Ubp3/Bre5的制备及与Cdc48作用（英文）

被引：0

作者：

苏文成 ^{[1
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吕操 ^{[1
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时丽丽 ^{[3
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景晓飞 ^{[1
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盖园明 ^{[2
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张洁 ^{[2
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谭焕波 ^{[2
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王鹏举 ^{[2
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夏立新 ^{[4
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邹培建 ^{[2
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秦刚 ^{[2
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机构：

[1] 天津工业技术大学生物技术学院

[2] 中国科学院天津工业生物技术研究所,国家工业酶重点实验室

[3] 天津药物研究院天津分子设计与药物发现重点实验室

[4] 深圳大学医学部,呼吸疾病国家重点实验室

[5] 深圳大学变态反应分室

来源：

深圳大学学报(理工版) | 2015年 / 32卷 / 01期

关键词：

结合蛋白质; Ubp3去泛素化酶; 结合辅因子Bre5; ATP酶Cdc48; 去泛素化复合体; 与谷光苷肽巯基转移酶沉淀试验; 直接相互作用;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q55 [酶];

学科分类号：

摘要：

泛素化是一种存在于真核细胞中与生理功能密切相关的蛋白修饰,泛素化与去泛素化处于动态调节过程中.Ubp3是与人USP10同源的酵母去泛素化酶,结合辅引子Bre5在细胞内发挥广泛作用.为研究该复合体的工作机制,制备重组蛋白复合体,在大肠杆菌中成功表达并纯化重组Ubp3与Bre5单体及Ubp3/Bre5复合体,首次成功大规模制备重组Ubp3/Bre5复合体.通过一系列pulldown实验,检验Ubp3/Bre5与AAA家族中泛素选择性ATP酶Cdc48的相互作用模式,结果发现,Ubp3及Bre5无法单独与Cdc48结合,但Ubp3/Bre5复合体可以有效与Cdc48相互作用.提出了Ubp3/Bre5-Cdc48相互作用的新模式,制备了高质量重组Ubp3/Bre5复合体.该研究为通过生化及结构生物学进行分子机制探索奠定了基础.

引用

页码：58 / 67

页数：10

共 11 条

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